Приготвяне на агарозен гел за електрофореза

Приготвяне на агарозен гел за електрофореза

Забележка: Винаги носете ръкавици за еднократна употреба!

Инструкции стъпка по стъпка

Претегляне на агарозен прах:uизползвайте хартия за теглене и електронна везна за измерване на 0,3 g агарозен прах (на базата на система от 30 ml).

Подготовка на TBST буфер:pпригответе 30 ml от 1x TBST буфер в 100 ml Ерленмайерова колба.

Разтваряне на агарозен прах:pпоставете агарозния прах в TBST буфера и разклатете добре.Поставете ги вътрев микровълнова фурна и загрейте (обикновено за 50 секунди, покрито с алуминиево фолио), докато се разтвори напълно.

Охлаждане и добавяне на нуклеаза:uПоставете ръкавици, за да извадите сместа от микровълновата и я оставете да се охлади леко в студена вода, докато стане топла (приблизително 60°C). Добавете 2 µl нуклеаза (заместител на Eb), докато разклащате, за да се смеси напълно.

Подготовка на формата за гел:

  • Cпостно и подсушететава за гел и устройство за леене на гелна резервоара за електрофореза.
  •  Pзавържете гелатававъв вътрешния резервоар и поставете гребена във фиксирана позиция.
  • Смесете разтвора на агарозен гел, охладен до около 65°C, и внимателно го изсипете върхутава за гелвустройство за леене на гел, като го разнасяте бавно, докато образува равномерен слой гел върху стъклената плоча.
  • Оставете го да престои на стайна температура, докато гелът се втвърди напълно.
  • Внимателно отстранете гребена вертикално и отстранете лентата.
  • Поставете гелатавав резервоара за електрофореза.

Важно: Уверете се, че няма въздушни мехурчета в областта на зъбите на гребена. Повърхността на течността трябва да е гладка без вълни.

Изпълнение на гела

Зареждане на гела

След като гелът се втвърди, поставете го в резервоара за електрофореза и изсипете буфера за електрофореза, докато гелът се потопи.

Подготовка на проби

  • Вземете маркера и буфера за зареждане от хладилника.
  • Добавете 6 µl зареждащ буфер към пробите и разбъркайте добре.
  • С помощта на микропипета бавно заредете пробите в големите ямки на гела (внимавайте да не пробиете гела и не разпръсквайте целия обем, за да избегнете въздушни мехурчета).
  • Заредете маркера в някоя от малките ямки (запомнете позицията му).

Стартиране на електрофореза

  • Покрийте резервоара за електрофореза и започнете електрофорезата веднага след зареждането на гела.
  • Задайте напрежението на 60-100V. Пробите ще мигрират от отрицателния електрод (черен) към положителния електрод (червен).
  • По-високото напрежение скъсява ефективния диапазон на разделяне на агарозния гел.
  • Спрете електрофорезата, когато бромофеноловото синьо багрило достигне около 1 cm от долния ръб на плочата с гел.

Наблюдаване на резултатите

След разделяне на лентите спрете електрофорезата, извадете гела и директно го детектирайте и снимайте.

Използвайте система за изображения с гел, за да снимате и наблюдавате лентите (проверете дали има ленти за маркера или пробите).

След като получите вашата карта с гел лента, намерете маркера. Въз основа на маркера можете да определите целевите ленти!

2

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) произвежда продукти за електрофореза повече от 50 години. Тук представяме нашите системи за хоризонтална електрофореза заагарозен гелелектрофореза.Изберетесистеми за хоризонтална електрофорезаот Пекин liuyi за вашия експеримент с гел електрофореза, за да помогнете на вашите изследвания в биотехнологичната индустрия.

3

Предлагаме различни модели резервоари за хоризонтална електрофореза за леене и течане на малкиагарозагелове до големиагарозагелове

Ръководство за избор на апарат за хоризонтална потопена гел електрофореза

图片1

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) е специализирана в производството на инструменти за електрофореза повече от 50 години със собствен професионален технически екип и R&D център. Разполагаме с надеждна и пълна производствена линия от проектиране до проверка и склад, както и маркетингова поддръжка. Нашите основни продукти са клетка за електрофореза (резервоар/камера), захранване за електрофореза, син светодиоден трансилюминатор, UV трансилюминатор, гел образ и система за анализ и т.н. Ние също така доставяме лабораторни инструменти като PCR инструмент, вортекс миксер и центрофуга за лаборатория.

Ако имате някакъв план за закупуване на нашите продукти, моля, не се колебайте да се свържете с нас. Можете да ни изпратите съобщение на имейл[имейл защитен]или[имейл защитен], или моля, обадете ни се на +86 15810650221 или добавете Whatsapp +86 15810650221, или Wechat: 15810650221.

Моля, сканирайте QR кода, за да го добавите в Whatsapp или WeChat.

2


Време на публикуване: 09 август 2024 г